商品詳情：
磷脂酶D(PLD)測(cè)試盒測(cè)定意義

磷脂酶D(EC3.1.4.4)即磷脂酰dan堿水解酶，是催化磷酸二酯鍵水解和堿基交換反應(yīng)的一類酶的總稱，廣泛存在于高等動(dòng)植物和細(xì)菌等多種生物體中，具有參與細(xì)胞脂質(zhì)代謝、信號(hào)傳導(dǎo)、生物膜形成的抗逆境脅等生理功能。

測(cè)定原理

磷脂酶D催化水解磷脂酰dan堿末端的磷脂酰二酯鍵生成磷脂酸和dan堿，dan堿在dan堿氧化酶催化作用下生成甜菜堿和過(guò)氧化氫，過(guò)氧化氫在過(guò)氧化氫酶的作用下將4-氨基安替林和重蒸酚氧化成粉紅色物質(zhì)，在500nm處有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、研缽、超速冷凍離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋，無(wú)水乙醇。
樣品中AA提?。?/span>

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來(lái)水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3.血清等液體：直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬(wàn)。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測(cè)定的吸光值過(guò)高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰，因此，570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。

星形肌動(dòng)蛋白2ELISA試劑盒 ASTN2免費(fèi)代測(cè)試劑

星形肌動(dòng)蛋白1ELISA試劑盒 ASTN1免費(fèi)代測(cè)試劑

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接分子1ELISA試劑盒 STAM1免費(fèi)代測(cè)試劑

信號(hào)素6DELISA試劑盒 SEMA6D免費(fèi)代測(cè)試劑

信號(hào)素6CELISA試劑盒 SEMA6C免費(fèi)代測(cè)試劑

信號(hào)素6BELISA試劑盒 SEMA6B免費(fèi)代測(cè)試劑

信號(hào)素6AELISA試劑盒 SEMA6A免費(fèi)代測(cè)試劑

信號(hào)素5BELISA試劑盒 SEMA5B免費(fèi)代測(cè)試劑

信號(hào)素5AELISA試劑盒 SEMA5A免費(fèi)代測(cè)試劑

信號(hào)素4GELISA試劑盒 SEMA4G免費(fèi)代測(cè)試劑

信號(hào)素4FELISA試劑盒 SEMA4F免費(fèi)代測(cè)試劑

信號(hào)素4DELISA試劑盒 SEMA4D免費(fèi)代測(cè)試劑

信號(hào)素4CELISA試劑盒 SEMA4C免費(fèi)代測(cè)試劑

信號(hào)素4BELISA試劑盒 SEMA4B免費(fèi)代測(cè)試劑

信號(hào)素4AELISA試劑盒 SEMA4A免費(fèi)代測(cè)試劑
磷脂酶D(PLD)測(cè)試盒ATP檸檬裂解酶（ACL）比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

ATP檸檬裂解酶（ACL）比色法檢測(cè)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣

血清高密度脂蛋白（HDLC）比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

血清高密度脂蛋白（HDLC）比色法檢測(cè)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣

血清低密度脂蛋白（LDLC）比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

血清低密度脂蛋白（LDLC）比色法檢測(cè)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣

肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶（CPT1)比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶（CPT1)比色法檢測(cè)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣

淀粉比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣